產(chǎn)品更新僅供科研-人胚腎細(xì)胞
傳代方法 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰-酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許-胰-酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰-酶，加入5-6mL完-全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐?全培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。
生長(zhǎng)條件 37℃；5%CO2+95%空氣；
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
存儲(chǔ)條件 液氮
類型 貼壁生長(zhǎng)
安全等級(jí) 1
形態(tài) 上皮細(xì)胞樣，短梭形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng)，背景干凈
分離基物 胚腎；5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化；女性
應(yīng)用領(lǐng)域 表達(dá)SV40大T抗原，可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞；用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染時(shí)可高表達(dá)AP融合蛋白。293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)?？梢詮?fù)制。@2017
在線咨詢